Zpracování materiálu pro mikroskopické vyšetření Jaroslava Dušková Ústav patologie 1.LF UK, Praha Fixace & zalití do parafinu Krájení Barvení Montování preparátu Tkáňové vzorky Resekát měchýře s tumorem Autotechnikon Parafinové bloky Mikrotomy Nátěry, cytocentrifugace Fixace (formalin, glutaraldehyd, vyschnutí, mražení) Barvení Montování Cytologické vzorky Stěr z děložního hrdla F N A B Tenkojehlová aspirační biopsie Proč barvíme preparáty ? pro zviditelnění struktur (empirická barviva pochází z textilního průmyslu) k průkazu určitého materiálu (např. Fe biochemická reakce – histochemie) zviditelnění mikroorganismů (bakterioskopie, mykózy, parasiti ) HE Hematoxylin - eozin Feulgen May-Grünwald-Giemsa MGG van Gieson - Elastica Modrý trichrom Olejová červeň – barvení lipidů Kongo červeň – amyloid (s následnou polarizací) Haemochromatosis myocardii Fe HE Barvení na železo PAS Candida – Ag Impregnace Candida – PAS Polychrom - Papanicolaou Candidiasis Ziehl- Neelsen (BK bacil Kochův) Auramin-Rhodamin - fluorescenční průkaz mykobakterií Helicobacter pylori (Warthin – Stary impregnace) Klüver- Barrera (Nissl + luxol blue) Imunohistochemie  detekce antigenu použitím protilátky (komerčně dostupné)  protilátka reaguje s antigenem a reakce je visualizována (většinou enzymatickým systémem , v němž produkt je barevný, např. diaminobenzidinem DAB) – hnědý reakční produkt Progesteronové receptory – nenádorová tkáň Ca mammae c-erbB2 Morfologické diagnostické metody  Patologické  macroskopie  microskopie  ultrastruktura  IMAGING – zobrazování Morfometrická vyšetření objektivizace & zpřesnění diagnostických postupů staging (např. maligní melanom – měření tloušťky) grading (např. karcinom ledviny – velikost jader)