Zpracování materiálu pro mikroskopické vyšetření Jaroslava Dušková Ústav patologie 1.LF UK, Praha Fixace & zalití do parafinu Krájení Barvení Montování preparátu Tkáňové vzorky Nátěry, cytocentrifugace Fixace (formalin, glutaraldehyd, vyschnutí, mražení) Barvení Montování Cytologické vzorky Polychrome - Papanicolaou F N A B Proč barvíme preparáty ? ⚫pro zviditelnění struktur (empirická barviva pochází z textilního průmyslu) ⚫k průkazu určitého materiálu (např. Fe biochemická reakce – histochemie) ⚫zviditelnění mikroorganismů (bakterioskopie, mykózy, parasiti ) HE Feulgen May-Grünwald-Giemsa MGG van Gieson - Elastica Blue Trichrom Oil red Kongo red Haemochromatosis myocardii Fe HE PAS Candida – Ag Impregnation Candida – PAS Candidiasis Ziehl- Nielsen (BK) Auramine-Rhodamine Helicobacter pylori (Warthin – Stary impregnation) Klüver- Barrera (Nissl + luxol blue) Imunohistochemie ⚫ detekce antigenu použitím protilátky (komerčně dostupné) ⚫ protilátka reaguje s antigenem a ⚫ reakce je visualizována (většinou enzymatickým systémem , v němž produkt je barevný, např. diaminobenzidinem DAB) – hnědý reakční produkt Progesteronové receptory – nenádorová tkáň Ca mammae c-erbB2 Morfologické diagnostické metody Patologické makroskopie mikroskopie ultrastruktura IMAGING – zobrazování Morfometrická vyšetření ⚫ objektivizace & zpřesnění diagnostických postupů ⚫staging (např. maligní melanom) ⚫grading (např. karcinom ledviny)