Proces diagnostiky uKvalifikované rozhodnutí informovaného lékaře. uBezchybná preanalytická fáze. uPřesná analýza. uSprávná interpretace výsledků. Faktory ovlivňující hodnoty biochemických parametrů uPreanalytická fáze – 80% chyb. u uAnalytická fáze – 5% chyb. u uPostanalytická fáze – 15% chyb. u u Preanalytická fáze uSoubor všech postupů a operací, kterými u projde vzorek biologického materiálu od u okamžiku, kdy je analýza požadována, do u okamžiku, kdy je vzorek zpracován. u uZahrnuje v sobě přípravu pacienta před odběrem, vlastní odběr s identifikací, uložením a transportem materiálu do laboratoře. Faktory preanalytické fáze a - ovlivnitelné ustravovací návyky, prodloužené lačnění až hladovění, dehydratace ukofein a kouření, alkohol, drogy, léky udiagnostické a terapeutické zásahy ustres unadmořská výška ufyzická zátěž a tělesná aktivita upoloha při odběru Faktory preanalytické fáze b - neovlivnitelné ucyklické variace – denní, noční upohlaví uvěk urasa ugravidita u u u Preanalytická fáze u1. Mimolaboratorní část u a. příprava pacienta před odběrem u b. odběr biologického materiálu u c. transport biologického materiálu do laboratoře u u2. Laboratorní část u a. příjem a registrace biologického materiálu u b. centrifugace u c. skladování vzorku u d. příprava vzorku před vlastním stanovením 1. Mimolaboratorní část a. příprava pacienta před odběrem uKontrola identifikace nemocného. uInformování pacienta o postupu při odběru. uOvěření dodržení potřebných dietních omezení před odběrem: ulačnění (10-12 hod), omezení příjmu tekutin, vyloučení alkoholu, tabáku, kofeinu uomezení tělesné aktivity, vyvarování se stresu uvyloučení léků u u 1. Mimolaboratorní část a. příprava pacienta před odběrem uNačasování odběru krve uProvádí se většinou ráno u uPřesné dodržení požadovaného načasování uje zcela rozhodující zejména u monitorování ufarmakoterapie a u funkčních testů. u 1. Mimolaboratorní část b. odběr biologického materiálu uPříprava příslušné dokumentace uPříprava odběrových pomůcek uPříprava odběrových zkumavek uŘádné označení zkumavek Žádanka o vyšetření uJméno a příjmení pacienta uRodné číslo /datum narození – muž, žena/ uČíslo zdravotní pojišťovny uDiagnóza hlavní uOznačení vzorku v režimu statim uOdbornost, razítko a podpis lékaře požadujícího vyšetření uDatum a čas odběru uIdentifikace odebírající osoby uDruh požadovaného vyšetření uDalší poznámky – léčba-léky, infuze, transfuze Údaje na identifikačním štítku uJméno a příjmení pacienta uRodné číslo nebo náhradní číslo pojištěnce nebo datum u narození u uIDEÁL: štítek vytištěný z informačního systému, lepený ujak na žádanku, tak na odběrovou nádobu u(jméno a příjmení, rodní číslo, kód pojišťovny, identifikace užádajícího lékaře, diagnóza, adresa pacienta) u uÚDAJE NA ŽÁDANCE A NA ŠTÍTKU S BIOLOGICKÝM uMATERIÁLEM MUSÍ BÝT SHODNÉ 1. Mimolaboratorní část analyzovaný materiál uKrev uvenózní uarteriální ukapilární u uVenózní krev usrážlivá (sérum) unesrážlivá (plazma) u u u u 1. Mimolaboratorní část analyzovaný materiál uMoč uMozkomíšní mok uStolice uPlodová voda uPot uSliny uTkáně uHnis uSputum u u 1. Mimolaboratorní část b. odběr vzorku venózní krve u20 min před odběrem zaujmout polohu vsedě uzajištění správné polohy paže uaplikace turniketu – odběr na laktát bez použití turniketu uposouzení kvality žilního systému – výběr jehly správného průsvitu u u u Odběr venózní krve uSprávný výběr paže: ujizvy uhematom uinfuze umastektomie u 1. Mimolaboratorní část b. odběr vzorku venózní krve u Desinfekce místa vpichu - pozor na alergii uDesinfekční prostředek musí před vpichem zaschnout umokrý = hemolýza, štípaní unutno dodržet dobu expozice uOtevřený systém – krev musí volně vytékat do u zkumavky, nepřípustné je nasávání do stříkačky a u následné přeplňování /poškození krevních buněk, u zkreslení koagulačního výsledku/. uUzavřený systém – při správném postupu dojde k u vyrovnání tlaku ve chvíli, kdy je množství krve ve u zkumavce po rysku. Upozornění !!! upozor na dobu zaškrcení turniketu ujakmile se objeví krev v odběrové nádobě, uvolnit u turniket upozici jehly v žíle neměnit urespektovat pořadí odebíraných vzorků uzkumavky s antikoagulans ihned po naplnění u mírným kývavým pohybem promíchat – netřepat!!! uodběrová nádoba nesmí být potřísněna u biologickým materiálem Poloha pacienta při odběru uVzpřímená pozice: ↑ hydrostatický tlak upřesun vody a iontů z plazmy→ ↑proteinů a krevních elementů = zahuštění plazmy u↑ hormonů u uPoloha vleže: ↓proteiny, enzymy (ALP,AST) ulátky na proteiny vázané: Ca, TC, hormony u u Faktory ovlivňující odběr krve uDlouho přiložený turniket, cvičení paží: u ↑ proteinů, lipidů, AST, CK, Fe,K, laktátu, Ca uTrauma: K, LD uTenká odběrová jehla: K, LD, ACP, AST, ALT, bilirubin uStopy antiseptika: degradační produkty fibrinogenu – hemolýza u u u Pořadí odebíraných vzorků uKrevní kultivace uNativní krev uCitrát uHeparin uEDTA uFluorid Koagulační faktory uBílkoviny krevní plazmy – glykoproteiny utvorba v játrech, funkce závislá na Ca2+ uaktivace: fibrinogen → fibrin u uZnačení římskými číslicemi v pořadí, uv jakém byly objeveny. u Koagulační faktory uI – fibrinogen uII – protrombin uIII – tkáňový tromboplastin uIV – Ca2+ uV – proakcelerin uVII – prokorventin uVIII – antihemofilický faktor A (von Willebrandův) – při absenci krvácivá choroba Antikoagulanty uHeparin: umalá interference s anal. testy uve formě solí (sodná, draselná, litná, amonná) uinhibice ACP, LDH uinhibuje protrombin→trombin (fibrinogen→fibrin) u uEDTA upro hematologická vyšetření uchelatační činidlo uinhibice ALP, CK udraselná sůl-malý vliv na lab. testy (některé metody Ca, Fe) u Antikoagulanty uCitrát sodný uváže Ca2+ uinhibice aminotransferáz, ALP ustimulace ACP uOxaláty uve formě solí unerozpustné komplexy s Ca2+ uinhibice LDH, amylázy, ACP, ALP u↓hematokrytu u Konzervanty uFluorid sodný uantiglykolytický prostředek uinhibice enzymů uslabé antikoagulační vlastnosti uinhibice ureasy ujodoacetát uantiglykolytický prostředek uinhibice CK u Krevní plazma, sérum utekutá složka krve uslouží jako médium pro přenos cukrů, lipidů, hormonů, metabolických produktů uje významným regulátorem acidobazické a osmotické rovnováhy uobsahuje a přenáší látky podporující srážení krve usérum na rozdíl od plazmy neobsahuje fibrinogen a další srážecí faktory krve Plná krev uHematologická vyšetření uStanovení krevních plynů uStanovení glykovaného hemoglobinu uStanovení některých stopových prvků uStanovení amoniaku uStanovení minerálů u Pozor uVýběr vhodného protisrážlivého činidla uZachování dodržení poměru mezi krví a antikoagulantem → může interferovat se stanovením analytů uHemolýza uTrombolýza uChylózní sérum/plazma uIkterické sérum/plazma u u Hemolýza uMírná – malý vliv na laboratorní testy uMasivní u ↑ K, LDH, AST, Mg, ALT, HDL-C, CK, ACP u ↓ GMT, ALP, amyláza u uZměna je závislá na koncentraci hemoglobinu → uovlivňuje fotometrická stanovení i průběh reakcí u u uTrombolýza - rozpad trombocytů, ↑K+ u u uChylózní plazma/sérum - ↑ TAG u u uIkterická plazma/sérum - ↑ bilirubin u u u u 1. Mimolaboratorní část b. odběr vzorku kapilární krve uHlavní zásady: udostatečné prokrvení bříška prstu udostatečná desinfekce uoschnutí desinfekce uvýběr správné lancety uodstranění první kapky krve uvyloučit mačkání prstu!!! uvyloučit vniknutí vzduchových bublin do kapilár na stanovení ABR u Odběr kapilární krve unejčastěji – třetí nebo čtvrtý prst nepíšící ruky u unovorozenci, nedonošenci - z bočních stran patičky nebo prstu (méně vhodný ušní lalůček nebo paleček na noze) uhloubka vpichu na patičce < 2,4 mm (narušení kosti, zvláště u nedonošenců) uprvní kapka otřít – vyšší procento tkáňového moku u 1. Mimolaboratorní část b. odběr vzorku arteriální krve uProvádí kvalifikovaný pracovník na lůžkovém oddělení uPřevážně ke stanovení parametrů ABR uProvádí se do originálních stříkaček s heparinem uPo odběru okamžitě vypudit veškeré vzduchové bubliny!!! uKrev nakláněním stříkačky promíchat u 1. Mimolaboratorní část b. odběr vzorku moče uVyšetření chemicky a sedimentu uprvní ranní moč ustřední proud uSběr moče za 24 hodin uobjem moče změřit s přesností na 10ml upo důkladném promíchání odebrat 10ml uSběr moče na stanovení mikroalbuminurie upřes noc ( 8 hodin) upřes den vyloučit fyzickou námahu u u Odběr vzorku moče uNepoužívat znečištěné skleněné nádoby uNepoužívat obaly od drogistických výrobků u uSběr moče na kyselinu vanilmandlovou u- 2 dny před sběrem pacient nesmí jíst ovoce, zeleninu, pít kávu, čaj, ovocné šťávy u- před sběrem do nádoby přidat 10 ml 6M HCl pro konzervaci u Odběr vzorku moče uSběr moče na katecholaminy, metanefriny -2 dny před sběrem vynechat potraviny s kofeinem, kakao, čokoládu, ořechy, sýry, banány, zeleninu -Sběrná nádoba s 10 ml 12,5 % HCl 1. Mimolaboratorní část b. odběr vzorku stolice uČerstvá stolice uokamžitý transport do laboratoře uVyšetření na přítomnost okultního krvácení ukrvácející vřed, nádor uU dětí ke stanovení aktivity trypsinu ucystická fibróza u 1. Mimolaboratorní část b. odběr slin uŽvýkání inertního materiálu uPrvní sliny vyplivnout u uStanovení krevních skupin uStanovení hladin léků uStanovení drog u 1. Mimolaboratorní část b. odběr vzorku plodové vody uAmniocentéza udiagnóza vrozených poruch uzjištění zralosti plodu u uprovádí se v lokálním umrtvení uinjekční stříkačkou za stálé kontroly ultrazvuku uvzorek chráníme před světlem uokamžitý transport do laboratoře 1. Mimolaboratorní část b. odběr vzorku mozkomíšního moku uProvádí lékař do sterilní zkumavky bez aditiv uVhodné použití atraumatické odběrové soupravy (zabránění arteficiální příměsi krve) uSterilní rukavice bez pudru!!! uDo 30 minut před odběrem odebrat vzorek krve uBezprostředně po odběru (max. do 1 hod) dopravit do laboratoře u Odběr mozkomíšního moku u umozkomíšní mok musí být předán sanitářem kliniky nebo pracovníkem žurnální služby osobně pracovníkovi laboratoře (datum, hodina příjmu, včetně podpisu sanitáře je zaznamenán v příjmovém sešitě pro mozkomíšní mok) uneposílat potrubní poštou u 1. Mimolaboratorní část b. odběr kostní dřeně pro cytogenetické vyšetření uodběr sternální punkcí provádí kvalifikovaný personál ucca 1 ml kostní dřeně sterilně odebrat do speciálně připravené a označené odběrové zkumavky s médiem (5ml PBS s heparinem) uodběrové zkumavky jsou připravovány v laboratoři a dodávány na příslušná pracoviště (vzorek odebraný do jiné zkumavky nelze zpracovat!) u Odběr kostní dřeně pro cytogenetické vyšetření uOdběrové zkumavky se vzorky opatřit štítkem se jménem a dalšími údaji pacienta, zkumavku dobře uzavřít uOdebrané vzorky vždy důkladně protřepat (nejlépe na třepačce), aby nedošlo ke sražení vzorku! uVzorek v žádném případě nemrazit! Při prodlení s odesláním uchovat vzorek v lednici nebo při pokojové teplotě u 1. Mimolaboratorní část c. transport biologického materiálu uŠetrný a rychlý uNevystavovat biologický materiál vysokým u teplotám a slunečnímu záření uNeskladovat krev v lednici uNeprodlužovat čas dodání do laboratoře uZajistit nejlépe okamžitý transport do laboratoře u max. po dobu, která je udána v laboratorní u příručce každého pracoviště u 2. Laboratorní část a. příjem a registrace biologického materiálu uPracovník příjmu provede kontrolu: uvhodnosti odběrového systému vzhledem k požadovanému vyšetření usouhlas mezi údaji na žádance a biologickým materiálem udostatečné množství odebraného materiálu upřidělí vzorku i žádance pořadové identifikační číslo s čárovým kódem podle požadovaného druhu vyšetření uprovede záznam do LISu 2. Laboratorní část ub. centrifugace (separace krevních elementů a tekuté složky krve) uc. skladování vzorku ud. příprava před vlastním stanovením u uVšechny tyto postupy preanalytické fáze use řídí podle platných SOP pro jednotlivá uvyšetření Na co si dát největší pozor v preanalytické fázi uNa identifikaci a přípravu pacienta uSouhlas údajů na žádance a biologickém materiálu uSprávný, šetrný a přesný odběr do vhodně zvolené odběrové zkumavky uRychlý a šetrný transport do laboratoře u u uChyby, kterých se dopustíme v průběhu preanalytické fáze, jsou místa před desetinnou čárkou. u uChyby, kterých se dopustíme při laboratorním vyšetření, jsou místa za desetinnou čárkou.