Hematologie

2.1.3 Zpracování odebrané krve a jejích složek

2.1.3 Zpracování odebrané krve a jejích složek
 
 
Odebraná krev a krevní složky se dále zpracovávají a slouží k výrobě transfuzních přípravků. Všechny úpravy by měly být provedeny v uzavřeném systému.
Po odběru plné krve je vhodné nejprve stabilizovat teplotu zpracovávané krve a krev by pak měla být v klidu nejméně 1 hodinu. Krev se pak většinou dále zpracovává centrifugací a oddělením jednotlivých složek a slouží pro výrobu jednotlivých transfuzních přípravků - plasma, erytrocyty, trombocyty.
Při centrifugaci se jednotlivé složky oddělí podle specifické hmotnosti, kdy se užívá vysokoobrátková centrifugace (4000-5000 g), při které se během 10-15 minut oddělí 3 vrstvy - plazma, buffy-coat (tenká, neprůhledná vrstva obsahující trombocyty a leukocyty) a erytrocyty. Je-li k odběru použit vak s horní i dolní výpustí je možné spodem vypustit erytrocyty, vrchem vytlačit plazmu a ve vaku zůstane buffy-coat, který se využívá pro výrobu trombocytového transfuzního přípravku.
Oddělené erytrocyty se v případě potřeby pomocí filtrace deleuzkotizují a poté se resuspendují v tzv. SAGM roztoku (izotonický roztok NaCl s glukózou) sloužící jako zdroj energie, s adeninem (metabolismus erytrocytů) a s manitolem (nutným pro stabilizaci membrány) tak, aby hodnota hematokritu byla mezi 0,5-0,7. Takto upravené erytrocyty umožní dlouhodobé skladování.
Kvalita oddělené plazmy je ovlivněna rychlostí s jakou došlo k jejímu oddělení od krevních složek, s rostoucí prodlevou oddělení, roste nebezpečí aktivace koagulace. Po oddělení je plazma rychle zamražena (pro klinické využití do 6 hodin, pro průmyslové využití do 18 h od odběru). Vlastní proces zmražení musí probíhat rychle, aby nedošlo k denaturaci a inaktivaci koagulačních faktorů.
Při postupném tání zmrazené plazmy zůstává nerozpuštěná velká část fibrinogenu, fibronektinu a von Willebrandova faktoru s faktorem VIII. Centrifugací lze oddělit tuto frakci plazmy označovanou jako směsný kryoprotein od zbytku plazmy (K-plazma - plazma bez směsného kryoproteinu) po oddělení se obojí zmrazí.
K výrobě trombocytového transfuzního přípravku se využívá vrstva buffy-coat 1 nebo více odběrů plné krve (terapeutická dávka je připravena ze 4-6 vrstev buffy-coat). Zbylé erytrocyty a většina leukocytů je od trombocytů oddělena mírnou centrifugací. K odstranění zbylých leukocytů se využívá deleukotizace filtrací (resuspenzní roztoky obsahují NaCl, citronan sodný, octan sodný).
V některých případech se při zpracování plné krve používá tzv. deleukotizace plné krve filtrací přes speciální filtry. Při této metodě dochází ke ztrátě trombocytů, není tedy vhodná k výrobě transfuzních přípravků trombocytů a také se při následné centrifugaci nevytvoří vrstva buffy-coat. Zároveň může filtrací docházet k částečné aktivaci koagulace.


Předchozí
Následující
Operace
Prohlédnout vše