Biochemie

4.4.1 Stanovení cholesterolu

Cholesterol je v plazmě/séru ze dvou třetin transportován jako součást LDL (aterogenní částice), asi jedna třetina je vázaná na HDL (neaterogenní částice).
Celkový cholesterol se v plazmě nachází ve dvou formách a to jako cholesterol volný (FC) - 30%  a cholesterol esterifikovaný (CE) -70%.Toto je nutné brát v úvahu při jeho stanovení. Nejčastěji se používá spektrofotometrická enzymová metoda. Princip metody: CE jsou cholesterolesterasou hydrolyzovány na FC a volnou mastnou kyselinu, FC se dále oxiduje cholesteroloxidasou na cholest-4-en-3-on a peroxid vodíku, jehož koncentrace se po reakci s indikátorem stanovuje.
 
Princip stanovení HDL-cholesterolu (HDL-C): lipoprotein HDL se od ostatních lipoproteinových částic separuje vysrážením lipoproteinů obsahujících apo B, další postup je stejný jako u celkového cholesterolu.
 
Koncentrace LDL-cholesterolu (LDL-C) se obvykle určuje výpočtem podle Friedewaldovy rovnice: LDL –C (mmol/l) = celkový cholesterol - TAG*0,4537 - HDL-C